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1982年8月毕业于上海戏剧学院表演系，获文学学士学位。同年拍摄成名作电影《笔中情》。1986年在电视剧《西游记》里饰演白龙马人型。2002年参演电视剧《金粉世家》，在剧中扮演白雄起。
2011年，王伯昭在《命运交响曲》中饰演宋承昊（迟帅饰）的父亲宋礼源，剧中二人将上演多场“剑拔弩张”的对手戏，此次是王伯昭与迟帅继《新京城四少》后，再次合作扮演父子 。
2012年，王伯昭与沈星浩、李宝能导演合作，出演电视剧《同在屋檐下》，剧中饰演洛铭 。同年，与李璟、李东恒等青年偶像演员合作出演电视剧《铁血男儿夏明翰》，剧中饰演章府老爷章炎，面对章承基、章妙菱（苏青饰）一双儿女皆被夏明翰搅的反目成仇，疼惜怜悯与恨铁不成钢的矛盾心理让他一次次陷入不仁不义 。
2013年，王伯昭参演由导演马功伟执导电视剧《更年期的战争》，该剧讲述了一位从海外留学归来的青年才俊任何与女强人母亲之间的情感碰撞和摩擦。
2014年，纪念邓小平诞辰110周年的电视剧《历史转折中的邓小平》在央视一套开播。该剧讲述1976年-1984年这段重要历史时期。王伯昭在剧中饰演荣毅仁 。
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